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細說腫瘤解離試劑盒的樣品收集₪│₪◕、處理及儲存方法

時間₪₪:2022-07-22 瀏覽次數₪₪:1107

  腫瘤解離試劑盒已被開發用於從人腫瘤組織中溫和₪│₪◕、快速地產生單細胞懸液✘•☁。 該試劑盒用於產生大量腫瘤細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞▩₪▩₪▩,同時保留重要的細胞表面表位✘•☁。該試劑盒與gentleMACS Dissociators結合▩₪▩₪▩,非常適合用於節省時間和可重複的製備單細胞懸液✘•☁。
 
  腫瘤解離試劑盒試劑準備₪₪:
  1₪│₪◕、使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25℃)▩₪▩₪▩,試劑不能直接在37℃溶解✘•☁。
  2₪│₪◕、標準品(凍幹品)₪₪:每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL▩₪▩₪▩,蓋好後室溫靜置大約10分鐘▩₪▩₪▩,同時反覆顛倒/搓動以助溶解▩₪▩₪▩,其濃度為2000pg/mL✘•☁。準備7個稀釋標準品的EP管▩₪▩₪▩,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液▩₪▩₪▩,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度▩₪▩₪▩, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔✘•☁。為保證實驗結果有效性▩₪▩₪▩,每次實驗請使用新的標準品溶液✘•☁。
  3₪│₪◕、濃洗滌液₪₪:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL▩₪▩₪▩,進行30倍稀釋✘•☁。
 
  腫瘤解離試劑盒的樣品收集₪│₪◕、處理及儲存方法₪₪:
  1₪│₪◕、血清₪₪:操作過程中避免任何細胞刺激✘•☁。使用不含熱原和內毒素的試管✘•☁。收集血液後▩₪▩₪▩,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離;
  2₪│₪◕、血漿₪₪:EDTA₪│₪◕、檸檬酸鹽₪│₪◕、肝素血漿可用於檢測✘•☁。1000×g離心30分鐘去除顆粒;
  3₪│₪◕、細胞上清液₪₪:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物;
  4₪│₪◕、組織勻漿₪₪:將組織加入適量生理鹽水搗碎✘•☁。1000×g離心10分鐘▩₪▩₪▩,取上清液;
  5₪│₪◕、儲存₪₪:如果樣品不立即使用▩₪▩₪▩,應將其分成小部分-70 ℃儲存▩₪▩₪▩,避免反覆冷凍✘•☁。儘可能的不要使用溶血或高血脂血✘•☁。如果血清中大量顆粒▩₪▩₪▩,檢測前先離心或過濾✘•☁。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍✘•☁。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍✘•☁。
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